नयाँ टेकको पूर्ण स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निकासी र पत्ता लगाउने मेसिन

पाँच शक्ति:
● न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्ध चरण संग कन्फिगर गरिएको उपकरण
● अल्ट्रासोनिक निकासी मोड्युलसँग कन्फिगर गरिएको उपकरण
● पूर्ण स्वचालित संग कन्फिगर गरिएको उपकरण
● चल तापक्रम प्रवर्धनको साथ कन्फिगर गरिएको उपकरण
● पूर्ण रूपमा संलग्न अभिकर्मक किटसँग कन्फिगर गरिएको उपकरण

1. के न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने अभिकर्मकहरू निकाल्न र शुद्ध गर्न आवश्यक छ?
न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने सिद्धान्त निम्नानुसार छ: प्राइमरको कार्य अन्तर्गत, DNA पोलिमरेज टेम्प्लेट DNA/RNA (NA को उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन आवश्यक) मा चेन प्रतिक्रिया प्रवर्धन गर्न प्रयोग गरिन्छ, र त्यसपछि जारी गरिएको फ्लोरोसेन्ट संकेतको मात्रा निर्धारण गर्न पत्ता लगाइन्छ। नमूनामा पत्ता लाग्ने रोगजनकको न्यूक्लिक एसिड (DNA/RNA) समावेश छ कि छैन।

१) निकासी वा शुद्धीकरण नगरिएका नमूनाहरूमा अन्तिम परिणामलाई असर गर्ने धेरै कम्पोनेन्टहरू हुन सक्छन्: न्यूक्लिज (जसले लक्ष्य न्यूक्लिक एसिडलाई विघटन गर्न सक्छ र गलत नकारात्मक निम्त्याउन सक्छ), प्रोटीज (जसले डीएनए पोलिमरेज घटाउन सक्छ र गलत नकारात्मक निम्त्याउन सक्छ), भारी धातु। नुन (जसले सिन्थेजको निष्क्रियता निम्त्याउँछ र गलत सकारात्मक निम्त्याउँछ), धेरै अम्लीय वा धेरै क्षारीय PH (जसले प्रतिक्रिया असफल हुन सक्छ), अपूर्ण आरएनए (झूटा नकारात्मक रिभर्स ट्रान्सक्रिप्शन विफलताको नेतृत्व गर्दछ)।

२) केही नमूनाहरू सीधै विस्तार गर्न गाह्रो हुन्छ: ग्राम-पॉजिटिभ र केही परजीवीहरू, तिनीहरूको बाक्लो कोशिका पर्खालहरू र अन्य संरचनाहरूको कारण, यदि तिनीहरू न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्धिकरण प्रक्रियामा जाँदैनन् भने, निकासी-रहित किट त्यस्ताका लागि असफल हुन सक्छ। नमूनाहरू।

तसर्थ, परीक्षण किट वा न्यूक्लिक एसिड निकासी चरणको साथ कन्फिगर गरिएको उपकरण चयन गर्न सिफारिस गरिन्छ।

2. रासायनिक निकासी वा भौतिक अल्ट्रासोनिक विखंडन निकासी?
सामान्यतया, रासायनिक निकासी धेरैजसो पूर्व उपचार र शुद्धिकरणमा लागू गर्न सकिन्छ।यद्यपि, बाक्लो पर्खालमा ग्राम-सकारात्मक ब्याक्टेरिया र केही परजीवीहरूमा, यो पनि मामला हो कि रासायनिक निकासीले प्रभावकारी न्यूक्लिक एसिड टेम्प्लेटहरू प्राप्त गर्न सक्दैन, फलस्वरूप गलत नकारात्मक पत्ता लगाउन सक्छ।थप रूपमा, रासायनिक निकासीले प्रायः बलियो एजेन्टहरू प्रयोग गर्दछ, यदि उत्सर्जन पूर्ण रूपमा छैन भने, प्रतिक्रिया प्रणालीमा बलियो क्षार परिचय गर्न सजिलो हुन्छ, परिणामस्वरूप गलत परिणामहरू हुन्छन्।

अल्ट्रासोनिक विखंडनले भौतिक क्रसिङ प्रयोग गर्दछ, जुन मानव प्रयोगको लागि POCT को क्षेत्रमा अग्रणी उद्यम, GeneXpert द्वारा सफलतापूर्वक प्रयोग गरिएको छ, र केहि जटिल नमूनाहरू (जस्तै माइकोब्याक्टेरियम ट्युबरकुलोसिस) को न्यूक्लिक एसिड निकासीमा पूर्ण फाइदा छ।

तसर्थ, परीक्षण किट वा न्यूक्लिक एसिड निकासी चरणको साथ कन्फिगर गरिएको उपकरण चयन गर्न सिफारिस गरिन्छ।र यो इष्टतम छ यदि त्यहाँ एक अल्ट्रासोनिक निकासी मोड्युल छ।

3. म्यानुअल, अर्ध स्वचालित र पूर्ण स्वचालित?
यो श्रम लागत र कार्य कुशलता को समस्या हो।वर्तमानमा, पर्याप्त कर्मचारीहरू बिना घरपालुवा अस्पतालहरू, र न्यूक्लिक एसिड निकासी र पत्ता लगाउने काम हो जसलाई निश्चित सीप र अनुभव चाहिन्छ।यसमा कुनै शंका छैन कि पूर्ण स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निकासी र पत्ता लगाउने मेसिन उत्तम विकल्प हो।

4. स्थिर तापक्रम प्रवर्द्धन वा परिवर्तनीय तापक्रम प्रवर्धन?
एम्पलीफिकेशन प्रतिक्रिया एक न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने लिङ्क हो, र यस लिङ्कमा संलग्न व्यावसायिक प्रविधि जटिल छ।लगभग बोल्दै, इन्जाइमहरू न्यूक्लिक एसिडलाई विस्तार गर्न प्रयोग गरिन्छ।एम्प्लीफिकेशन प्रक्रियामा, एम्प्लीफाइड फ्लोरोसेन्स सिग्नल वा एम्बेडेड फ्लोरोसेन्स सिग्नल पत्ता लगाइन्छ।सामान्यतया भन्नुपर्दा, जति पहिले फ्लोरोसेन्स संकेत देखिन्छ, नमूनाको लक्षित जीन सामग्री त्यति नै बढी हुन्छ।

स्थिर तापमान प्रवर्द्धन एक निश्चित तापमान मा एक न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन हो, जबकि चर तापमान प्रवर्धन एक चक्रीय प्रवर्द्धन हो कडाई denaturation-annealing-विस्तार अनुसार।स्थिर तापमान प्रवर्द्धन समय गरिएको छ, जबकि चर तापमान प्रवर्द्धन समय तापमान वृद्धि र उपकरणको गिरावटको दरले धेरै प्रभावित हुन्छ (वर्तमानमा, धेरै निर्माताहरूले लगभग 30 मिनेटमा 40 चक्र एम्प्लीफिकेशन गर्न सक्षम भएका छन्)।

यदि प्रयोगशालाको अवस्था राम्रो छ र जोनिंग कडा छ भने, यो भन्न उचित छ कि दुई बीचको शुद्धता भिन्नता ठूलो हुनेछैन।यद्यपि, परिवर्तनशील तापमान प्रवर्धनले अपेक्षाकृत छोटो समयमा अधिक न्यूक्लिक एसिड उत्पादनहरू संश्लेषण गर्नेछ।कडा जोनिङ र व्यावसायिक प्रशिक्षण कर्मचारीहरू बिना प्रयोगशालाहरूको लागि, न्यूक्लिक एसिड एरोसोल रिसावको जोखिम बढी हुनेछ, एक पटक चुहावट भएपछि गलत सकारात्मक हुन्छ, र यसलाई हटाउन अत्यन्तै गाह्रो हुन्छ।

थप रूपमा, स्थिर तापमान प्रवर्द्धन पनि गैर-विशिष्ट प्रवर्धनको लागि अधिक प्रवण हुन्छ जब नमूना जटिल हुन्छ (सापेक्ष प्रतिक्रिया तापमान कम छ, र उच्च विस्तार तापमान, राम्रो प्राइमर बाध्यकारी विशिष्टता)।

जहाँसम्म हालको प्रविधि चिन्तित छ, चर तापमान प्रवर्धन अधिक विश्वसनीय छ।

5. न्यूक्लिक एसिड प्रवर्द्धन उत्पादनहरूको चुहावटको जोखिमबाट कसरी बच्ने?
वर्तमानमा, धेरै उत्पादकहरूले ग्रन्थि प्रकारको पीसीआर ट्यूबलाई न्यूक्लिक एसिड प्रतिक्रिया ट्यूबको रूपमा रोज्छन्, जुन घर्षणद्वारा बन्द हुन्छ, र चल तापमान पीसीआर प्रवर्द्धनमा चर तापमान विकृतीकरणमा तापमान विकृतिकरण 90 डिग्री पुग्छ।
सेन्टिग्रेड।गर्मीको साथ बारम्बार विस्तारको प्रक्रिया र चिसो संग संकुचन PCR ट्यूब को सील को लागी एक ठूलो चुनौती हो, र ग्रन्थि प्रकार PCR ट्यूब चुहावट को कारण अपेक्षाकृत सजिलो छ।

प्रतिक्रिया उत्पादनको चुहावटबाट बच्नको लागि पूर्ण रूपमा सिल गरिएको किट/ट्यूबको साथ प्रतिक्रिया अपनाउन राम्रो हुन्छ।यदि त्यहाँ न्यूक्लिक एसिड निकासी र पत्ता लगाउनको लागि पूर्ण रूपमा सिल गरिएको किट बनाउन सकिन्छ भने यो उत्तम हुनेछ।

त्यसैले न्यू टेकको नयाँ पूर्ण स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निकासी र पत्ता लगाउने मेसिनमा माथिका पाँचवटा इष्टतम विकल्पहरू छन्।